CIP2A-proteiinin rooli MYC-proteiinin säätelyssä
Halonen, Tuuli (2016-11-08)
Aineistoon ei liity tiedostoja.
Halonen, Tuuli
Turun yliopisto
08.11.2016
Kuvaus
Siirretty Doriasta
Tiivistelmä
Transkriptiotekijä MYC on laajasti tutkittu onkogeeni. Se on välttämätön solujen jakautumisessa eli proliferaatiossa ja sen rooli syövän kehittymisessä tunnetaan hyvin. Terveissä soluissa MYC-proteiinin puoliintumisaika on lyhyt, mutta syöpäsoluissa sen puoliintumisaika on pidentynyt. Kasvunrajoitegeeni proteiinifosfataasi 2 A (PP2A) säätelee MYC-proteiinia irrottamalla siitä seriini 62 -aminohapon fosfataasitähteen josta seuraa MYC-proteiinin ubikitiinivälitteinen hajoaminen. Tutkimusryhmämme löysi proteiinin, joka esti MYC-proteiinin PP2A-välitteistä hajoamista ja täten stabiloi MYC-proteiinia. Proteiini nimettiin CIP2A:ksi (engl. cancerous inhibitor of PP2A, PP2A-proteiinin tuumorigeeninen estäjä). Löytämisensä jälkeen CIP2A-proteiinin on havaittu toimivan onkogeenina useissa syöpätyypeissä. Terveessä kudoksessa CIP2A esiintyy luuytimessä ja kiveksissä, eli kudoksissa joissa esiintyy nopeaa solunjakautumista.
Tutkimuksen tavoitteena oli lisätä ymmärrystä lähes tuntemattoman CIP2A-proteiinin toiminnasta MYC-proteiinin säätelyssä. Keskeinen kysymys oli, missä solun osastossa CIP2A säätelee MYC-proteiinia. CIP2A-proteiinin oli näytetty alun perin sijaitsevan solulimassa, kun taas transkriptiotekijä MYC sijaitsee tunnetusti tumassa. Lisäksi haluttiin selvittää, sääteleekö CIP2A kaikkien solun MYC-proteiinien sijaan erityisesti jotain tiettyä MYC-proteiinien ryhmää, esimerkiksi tietyllä tavalla post-translationaalisesti muokattuja MYC-proteiineja.
CIP2A-proteiinin sijainnin selvittämiseksi HeLa-solulinjan soluja fraktioitiin esimerkiksi sytoplasma- ja tumafraktioihin. Proteiinien sijaintia ja suhteellista pitoisuutta tutkittiin western blot -menetelmällä. Myös immunofluoresenssikuvausta käytettiin tutkittaessa CIP2A-proteiinin jakautumista solun eri osastoihin. Kromatiini-immunosaostuksen avulla (engl. Chromatin immunoprecipitation, ChIP) tutkittiin CIP2A-proteiinin vaikutusta MYC-proteiinin DNA-sitoutumiseen.
Tutkimuksessa saatiin selville, että CIP2A-proteiinia esiintyy myös tumassa. Sitä kuljetetaan aktiivisesti soluliman ja tuman välillä. Lisäksi saatiin selville, että CIP2A suojaa erityisesti tuman lamiini-assosioitua seriini-62-fosforyloitua MYC-proteiinia hajotukselta. Tämä MYC-proteiinin muoto on välttämätön solujen proliferaatiolle, eli CIP2A suojaa erityisesti proliferaatioon tarvittavaa MYC-proteiinien ryhmää. Tutkimuksen perusteella CIP2A on keskeinen MYC-proteiinin säätelijä. CIP2A-proteiinin toiminnan parempi tunteminen auttaa meitä ymmärtämään syövän molekyylibiologista taustaa.
Tutkimuksen tavoitteena oli lisätä ymmärrystä lähes tuntemattoman CIP2A-proteiinin toiminnasta MYC-proteiinin säätelyssä. Keskeinen kysymys oli, missä solun osastossa CIP2A säätelee MYC-proteiinia. CIP2A-proteiinin oli näytetty alun perin sijaitsevan solulimassa, kun taas transkriptiotekijä MYC sijaitsee tunnetusti tumassa. Lisäksi haluttiin selvittää, sääteleekö CIP2A kaikkien solun MYC-proteiinien sijaan erityisesti jotain tiettyä MYC-proteiinien ryhmää, esimerkiksi tietyllä tavalla post-translationaalisesti muokattuja MYC-proteiineja.
CIP2A-proteiinin sijainnin selvittämiseksi HeLa-solulinjan soluja fraktioitiin esimerkiksi sytoplasma- ja tumafraktioihin. Proteiinien sijaintia ja suhteellista pitoisuutta tutkittiin western blot -menetelmällä. Myös immunofluoresenssikuvausta käytettiin tutkittaessa CIP2A-proteiinin jakautumista solun eri osastoihin. Kromatiini-immunosaostuksen avulla (engl. Chromatin immunoprecipitation, ChIP) tutkittiin CIP2A-proteiinin vaikutusta MYC-proteiinin DNA-sitoutumiseen.
Tutkimuksessa saatiin selville, että CIP2A-proteiinia esiintyy myös tumassa. Sitä kuljetetaan aktiivisesti soluliman ja tuman välillä. Lisäksi saatiin selville, että CIP2A suojaa erityisesti tuman lamiini-assosioitua seriini-62-fosforyloitua MYC-proteiinia hajotukselta. Tämä MYC-proteiinin muoto on välttämätön solujen proliferaatiolle, eli CIP2A suojaa erityisesti proliferaatioon tarvittavaa MYC-proteiinien ryhmää. Tutkimuksen perusteella CIP2A on keskeinen MYC-proteiinin säätelijä. CIP2A-proteiinin toiminnan parempi tunteminen auttaa meitä ymmärtämään syövän molekyylibiologista taustaa.