Aggregatibacter actinomycetemcomitansin ulkokalvon lipopolysakkaridin ja HofQ-kanavaproteiinin potentiaalinen kyky häiritä ihmisen immuunivastetta
Kovesjoki, Laura (2020-05-20)
20.05.2020
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
Julkaisun pysyvä osoite on:
http://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2020070146618
http://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2020070146618
Tiivistelmä
Aggregatibacter actinomycetemcomitans on gram-negatiivinen bakteeri ja yksi parodontiittia aiheuttavista bakteereista. Se muodostaa biofilmin ientaskuun hampaan pinnalle ja aiheuttaa tulehduksen, joka tuhoaa hampaiden tukikudoksia. Bakteerin ulommalla solukalvolla on HofQ-proteiini, joka todennäköisesti kuljettaa DNA:ta solukalvon läpi ja emHofQ on siitä N-terminaalinen solukalvon ulkoinen osa. Ulommalla solukalvolla on myös lipopolysakkarideja (LPS), jotka koostuvat lipidistä ja pitkästä polysakkaridiketjusta. Polysakkaridissa on toistojakso, O-antigeeni, jonka rakenne määrää bakteerin serotyypin.
Tutkimuksen tavoite oli selvittää, voisiko LPS:llä ja HofQ:lla olla merkitystä IL-8:n sisäänotossa bakteerisolun sisään. HofQ:sta tutkittiin sen solukalvon ulkoista osaa, emHofQ:ta. emHofQ:sta tuotettiin kolmea muokattua proteiinia, joissa oli muutettu aminohappoja kahdesta silmukasta (K134-K139, D164-S167). Nämä kaksi silmukkaa muodostavat pinnan, johon IL-8:n arveltiin sitoutuvan. Sitoutumiskokeilla testattiin IL-8:n ja IL-1β:n sitoutumista emHofQ-proteiiniin ja IL-8:n sitoutumista LPS:n eri serotyyppeihin
Sitoutumiskokeet osoittivat, että IL-8 ja IL-1β sitoutuvat A. actinomycetemcomitansin emHofQ-proteiinissa kahden silmukan (K134-K139, D164-S167) muodostamaan pintaan. Lisäksi eri kantojen LPS:iin IL-8 sitoutuu eri voimakkuuksilla. Sitoutumisen voimakkuus ei ollut riippuvainen serotyypistä tai epäpuhtautena olevien proteiinien tai DNA:n määristä.
Tulosten perusteella näyttää siltä, että LPS saattaa konsentroida IL-8:a solun pinnalle, josta HofQ siirtää sitä kalvojen väliseen tilaan.
Tutkimuksen tavoite oli selvittää, voisiko LPS:llä ja HofQ:lla olla merkitystä IL-8:n sisäänotossa bakteerisolun sisään. HofQ:sta tutkittiin sen solukalvon ulkoista osaa, emHofQ:ta. emHofQ:sta tuotettiin kolmea muokattua proteiinia, joissa oli muutettu aminohappoja kahdesta silmukasta (K134-K139, D164-S167). Nämä kaksi silmukkaa muodostavat pinnan, johon IL-8:n arveltiin sitoutuvan. Sitoutumiskokeilla testattiin IL-8:n ja IL-1β:n sitoutumista emHofQ-proteiiniin ja IL-8:n sitoutumista LPS:n eri serotyyppeihin
Sitoutumiskokeet osoittivat, että IL-8 ja IL-1β sitoutuvat A. actinomycetemcomitansin emHofQ-proteiinissa kahden silmukan (K134-K139, D164-S167) muodostamaan pintaan. Lisäksi eri kantojen LPS:iin IL-8 sitoutuu eri voimakkuuksilla. Sitoutumisen voimakkuus ei ollut riippuvainen serotyypistä tai epäpuhtautena olevien proteiinien tai DNA:n määristä.
Tulosten perusteella näyttää siltä, että LPS saattaa konsentroida IL-8:a solun pinnalle, josta HofQ siirtää sitä kalvojen väliseen tilaan.