Fibroblastien vaikutus eturauhassyöpäsolujen migraatioon ja invaasioon 3D-kasvatuksissa
2.36 MB
avoin
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
Lataukset950
Pysyvä osoite
Verkkojulkaisu
DOI
Tiivistelmä
Eturauhassyövän kantasolut ovat kantasolujen kaltaisia erilaistumattomia syöpäsoluja. Nämä solut ilmentävät paljon α2β1-integriiniä, joka välittää solun sitoutumista soluväliaineeseen erityisesti kollageeni I:n kautta ja joka on tärkeä luumetastaasissa. Soluväliainetta kudoksissa tuottavat muun muassa fibroblastit. Syöpäkasvaimissa esiintyvät fibroblastit vaikuttavat kasvaimen kasvuun, tuottavat soluväliaineen proteiineja, kuten kollageeni I:tä, ja vaikuttavat näin myös syöpäsolujen liikkumiseen.
Erikoistyössä tarkasteltiin fibroblastien vaikutusta syöpäsolujen invaasioon ja migraatioon 3D-kasvatuksissa eli sferoideissa. Kokeissa käytettiin kahta eri eturauhassyöpäsolulinjaa, joita olivat DU145 (kohtalaisesti metastoiva solulinja) ja PC3 (korkeasti metastoiva solulinja). Molemmat linjat ilmentävät lähes yhtä paljon α2-integriiniä. Fibroblasteina käytettiin ihmisen eturauhasen syöpäkasvaimesta eristettyjä primaarifibroblasteja. Solujen invaasiota ja migraatiota tutkittiin kollageeni I:n avulla. Fibroblastien ja syöpäsolujen sijoittumista sferoideissa toisiinsa nähden tarkasteltiin fluoresoivien CellTracker-värien avulla. Massaspektrometrialla ja Western Blot -menetelmällä selvitettiin fibroblastien vaikutusta sferoidien mikroympäristöön.
Invaasion huomattiin lisääntyvän, kun DU145-soluja kasvatettiin yhdessä fibroblastien kanssa. Migraatiokokeissa eroa ei havaittu. PC3-solut eivät muodostaneet sferoideja ilman fibroblasteja, joten fibroblastien vaikutusta PC3-solujen invaasioon ja migraatioon ei voitu määrittää. Verrattaessa yhteisviljelmiä keskenään voitiin havaita, että DU145+fibroblastit -sferoidien solut invasoivat ja migroivat yllättäen enemmän kuin PC3+fibroblastit -sferoidien solut. Lisäksi fibroblastien havaittiin sijoittuvan yhteisviljelmissä eri tavalla. DU145-solujen kanssa fibroblastit sijoittuivat sferoidin reuna-alueille ja PC3-solujen kanssa sferoidin keskiosaan. Massaspektrometritulokset osoittivat useiden proteiinien, esimerkiksi kollageeni XVIII:n fragmentin endostatiinin, ilmentyvän enemmän yhteisviljelmissä. Erot endostatiinin ilmentymisessä osoitettiin myös Western Blot -menetelmällä.