Notch-ligandi Jagged1 suojaa DNA:n eheyttä
1.5 MB
avoin
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
Lataukset241
Pysyvä osoite
Verkkojulkaisu
DOI
Tiivistelmä
Rintasyöpä on maailmanlaajuisesti naisten yleisin syöpätyyppi. Syövän tunnusmerkkejä ovat muun muassa kasvanut DNA-vaurioiden määrä sekä muutokset solujen normaalissa kasvussa ja ohjelmoidussa solukuolemassa. Osana Notch-soluviestintää Jagged1 osallistuu soluissa edellä mainittuihin prosesseihin. Jagged1:n korkea ilmentyminen on liitetty aggressiivisiin,huonon ennusteen rintasyöpiin, mikä tekee Jagged1:stä mielenkiintoisen ja potentiaalisen kohteen tulevaisuudessa kohdennetummille syöpähoidoille.
Erikoistyön tavoitteena oli selvittää Jagged1:n vaikutus DNA:n eheyden suojaamiseen replikaatiostressin ja mitoosin aikana. DNA-vaurioita tutkittiin MDA-MB-231-rintasyöpäsoluissa, joista käytössä oli villityyppi (WT) sekä Jagged1-hiljennetty (Jag1KO) solulinja. Soluihin aiheutettiin replikaatiostressiä hydroksiureakäsittelyllä, ja sen vaikutusta soluihin seurattiin hyödyntämällä Western blot -menetelmää sekä immunofluoresenssivärjäystä. Lisäksi tutkimuksessa selvitettiin, onko Jagged1:n puuttumisella vaikutus mitoosiin. Osana projektia oli myös immunosaostuksen avulla varmistaa mitoottisista ihmisen alkion munuaissoluista (engl. human embryonic kidney cells, HEK; soluissa Jagged1 yli-ilmennetty) massaspektrometrialla saatu tulos Jagged1:n proteiini–proteiinivuorovaikutuksesta p53:n kanssa
Jag1KO-soluissa havaittiin alentunut replikaatiostressivaste. Jag1KO-soluissa havaittiin enemmän katkoksia DNA:n kaksoissäikeessä verrattaessa WT-soluihin eli Jagged1:n puuttuminen aiheutti soluihin DNA-vaurioita. Proliferaatiokokeessa nähtiin myös, että Jag1KO-solut jakautuivat hitaammin kuin WT-solut. Tämän lisäksi Jag1KO-soluissa mitoosi oli hitaampaa. Massaspektrometriasta saatu tulos Jagged1:n ja p53:n välisestä vuorovaikutuksesta mitoottisissa HEK-soluissa saatiin varmennettua