KORKEAN pH:n VAIKUTUS KOHDUNKAULANSYÖVÄSTÄ ERISTETTYIHIN ELÄVIIN CaSki SOLUIHIN

Abstract

Tavoitteena työssä oli tutkia emäksisen liuoksen vaikutuksia elävään soluun. Kirjallisuudessa on esitetty hypoteesejä syöpäkudokseen ja syöpäsoluihin liittyvän normaalista poikkeavan käänteisen pH tasapainon hyväksikäytöstä syövän hoidossa,jolloin lääkityksellä voitaisiin yrittää kääntää syöpäkudoksen hapan soluvälitila ja emäksinen strooma kohden normaalia pH tasapainoa. Työssä kasvatettiin ihmisperäisiä kohdunkaulan syövästä eristettyjä CaSki soluja, sekä määritettiin soveltuvia mikroskooppisia tutkimusmenetelmiä eläville soluille tehdyn korkean pH altistuksen jälkeisten tapahtumien seurantaan. Elävien solujen emäksiseen altistukseen käytetty liuos valmistettiin natriumhydroksidista ja säädettiin pH:n arvoon 9,0. Työssä perehdyttiin myös aiempaan aihetta käsittelevään kirjallisuuteen. Kokeellisessa osuudessa havainnoitiin emäksisen ympäristön vaikutusta solun elinkelpoisuuteen vaihekontrasti ja konfokaalimikroskopian keinoin. Tutkimusmenetelminä käytettiin sekä fluoresoivia pH herkkiä leima aineita että fluoresoivia Bcl 2 molekyyliin sitoutuvia vasta aineita. Konfokaalimikroskooppi Zeiss LSM880 osoittautui parhaaksi käytettävissä olevaksi kuvantamismenetelmäksi elävien solujen tutkimiseen työssä käytetyssä tutkimusasetelmassa. Tutkimuksen tuloksena saatiin selvitettyä menetelmiä ja kokeellisia toimintatapoja, joiden avulla voidaan tutkia eläviä soluja. Menetelmät solujen kasvattamiseen ja käsittelyyn, emäksisen pH altistuksen tekeminen, elävien solujen leimaaminen sekä yhdellä että kahdella eri leima aineella saatiin kokeellisesti toteutettua. Tutkimuksen tuloksena havaittiin pH herkkien leimojen soveltuvan solunsisäisten vesikkelien ja niiden liikkeiden havaitsemiseen elävässä solussa. Jatkossa kuvantamisen voisi tehdä nopeammin, jolloin voitaisiin vielä paremmin havaita vesikkelien liikettä. Nyt tehtyjen kuvantamisten tarkkuus oli suuri, mutta ajallisesti liian hidasta solun sisäisen vesikkeliliikenteen havainnoimiseen. Mahdollisena jatkotutkimuksen kohteena voisi olla selvittää olemassa olevien solun pH:ta säätävien lääkeaineiden vaikutusta CaSki syöpäsoluihin ja niiden vesikkeliliikenteeseen.