UHPLC-menetelmät B-vitamiinien samanaikaisessa analysoinnissa

Abstract

B-vitamiinit ovat ihmisille välttämättömiä vesiliukoisia vitamiineja, jotka koostuvat kahdeksasta perusrakenteesta sekä niiden johdannaisista ja aktiivisista muodoista. B-vitamiinien perusrakenteita ovat tiamiini, riboflaviini, niasiini, pantoteenihappo, pyridoksiini, foolihappo ja kobalamiini, ja ne ovat kofaktoreita ja koentsyymejä monissa kehon reaktioissa. B-vitamiinien puute voi johtaa erittäin vakaviin sairauksiin, mikä puolestaan on tehnyt niistä merkittävän tutkimuskohteen. Korkean erotuskyvyn nestekromatografia on yleisin B-vitamiinien analyysissä käytettävä menetelmä ja uudet menetelmät perustuvat pääasiassa ultratehokkaisiin nestekromatografisiin (UHPLC) analyyseihin. B-vitamiinien analysointiin halutaan kehittää nopeita, yksikertaisia ja tehokkaita menetelmiä, mutta analysointia vaikeuttaa B-vitamiinien hajoamisalttius, matriisivaikutus ja erilaisten B-vitamiinirakenteiden suuri määrä. Vitamiinit täytyy erottaa monimutkaisen matriisin muista yhdisteistä, kuten proteiineista, esimerkiksi entsyymeillä, ja parhaan tuloksen saamiseksi B-vitamiinit täytyy suojata valolta, hapettumiselta ja lämmöltä. UHPLC-MS/MS on suosittu menetelmä B-vitamiinien samanaikaiseen analysointiin, ja sillä on voitu analysoida tarkasti jopa seitsemän B-vitamiinia samanaikaisesti.