2D-nestekromatografia alkaloidien analyysimenetelmänä

Abstract

Alkaloidit ovat laaja, rakenteellisesti monimuotoinen luonnonyhdisteryhmä, jonka edustajilla on paljon bioaktiivisia ominaisuuksia ja kyky vaikuttaa keskushermostoon. Alkaloidien luokittelulle on monia perusteita, mutta niiden rakenteita yhdistää typpiatomi sekä emäksinen luonne. Alkaloidien kemiallisten ominaisuuksien ansiosta niitä on hyödynnetty pitkään lääkkeinä erilaisia haastavia sairauksia vastaan. Esimerkiksi vinka-alkaloideihin kuuluvat vinkristiini ja vinblastiini, jotka toimivat mitoosimyrkkynä syöpää vastaan tai akonitiini, joka toimii lääkkeenä neurotoiminnan häiriöihin. 2D-nestekromatografia (2D-LC) on analyysitapa, jota voidaan hyödyntää monimutkaisten alkaloidirakenteiden analytiikassa. Se koostuu kahdesta eri vaiheesta, joita yhdistää suoraliitäntäisen laitteiston tapauksessa vaihtoventtiili. Ensimmäisen ja toisen vaiheen kolonnien erotusmenetelmät eroavat toisistaan, jolloin analyysimenetelmästä tulee tarkempi. 2D-LC yhdistetään alkaloidianalyysille optimaaliseen detektoriin ja lisäksi kiinnitetään huomiota laitteiston mahdollisimman hyvään ortogonaalisuuteen. Yhden piikin tarkennusta varten siirretään vain sitä vastaava fraktio 1D-laitteistosta 2D-kolonnille, jolloin kyseessä on pääfraktion siirtomenetelmä. Jos koko näyte halutaan analysoida toisessa vaiheessa, voidaan puhua kattavasta 2D-nestekromatografiasta. 2D-nestekromatografia on oivallinen alkaloidianalytiikkaan, sillä kasvit muodostavat monien yhdisteiden seoksia, joissa alkaloiditkin ovat osana ja sen lisäksi alkaloideilla on itsellään analytiikan osalta haastavia rakenteita. Siksi tarvitaan parempia puhdistusmenetelmiä, jotka lisäävät analyysin selektiivisyyttä, piikkien intensiivisyyttä sekä tarkkuutta. Kun yhdistetään hyvä ortogonaalisuus kummassakin vaiheessa käytettäviin, alkaloideille optimaalisiin liuottimiin, saadaan entistä tarkempia tuloksia. 2D-nestekromatografia on potentiaalinen työkalu monimutkaisten luonnonyhdisteiden analysointiin, joka mahdollistaa tarkempia tuloksia perinteisiin nestekromatografiamenetelmiin verrattuna.